在使用臺式BOD五日生化測定儀進行檢測時,空白樣超標會嚴重影響測量結果的準確性和可靠性。為快速定位問題,本手冊從多個維度梳理空白樣超標的原因及排查方法。 一、實驗用水問題 實驗用水質量不佳是導致空白樣超標的常見原因。若使用的蒸餾水或去離子水受到污染,含有機物或微生物,會在培養過程中消耗溶解氧,致使空白樣BOD值升高。排查時,可先檢查制水設備是否正常運行,如檢查去離子柱是否失效;同時,對實驗用水進行微生物檢測或 TOC(總有機碳)檢測,若檢測結果異常,應更換新的實驗用水,或使用更高級別的超純水重新進行空白實驗,觀察空白樣數值變化。 二、試劑污染 BOD測定所需的試劑,如接種液、稀釋水添加的營養鹽溶液等,若受到污染,會引入額外的生物活性物質或有機物,導致空白樣超標。檢查試劑的保質期和儲存條件,觀察試劑是否渾濁、變色或有異味;對懷疑污染的試劑,可進行空白對照實驗,即用新配制的試劑與原試劑分別進行空白樣測定,對比結果。若新試劑空白樣正常,說明原試劑存在問題,需重新配制。 三、器皿不潔 實驗過程中使用的培養瓶、量筒、移液管等器皿若未徹底清洗干凈,殘留的有機物或清潔劑會污染空白樣。仔細檢查器皿內壁是否有污漬殘留,尤其是培養瓶,其密封性和清潔度對結果影響較大。對所有使用的器皿重新進行清洗,按照洗滌劑浸泡、清水沖洗、蒸餾水潤洗的流程操作,必要時可使用高溫滅菌或酸浸泡等方法深度清潔,清潔后再次進行空白實驗,判斷是否因器皿問題導致超標。 四、操作失誤 在稀釋水配制、接種液添加、樣品轉移等操作環節出現失誤,也會造成空白樣異常。例如,移液時未準確吸取規定體積的溶液,或接種液添加量過多,都會使空白樣中微生物數量或有機物含量增加。重新核對操作步驟,檢查移液槍的準確性和校準情況;在操作過程中嚴格按照標準流程執行,避免交叉污染,如更換吸頭、使用專用器皿等,重新進行空白樣測定,驗證操作是否規范。 五、環境因素影響 實驗室環境中的微生物、有機物氣溶膠等污染物,可能進入空白樣中,導致空白值升高。檢查實驗室是否存在通風不良、衛生條件差等問題,是否有污染源靠近實驗區域。可對實驗室進行清潔、消毒,加強通風換氣,必要時在超凈工作臺中進行空白樣操作;同時,檢查培養箱的溫度控制是否準確,溫度波動過大可能影響微生物生長,導致空白樣BOD值不穩定,若溫度異常,需對培養箱進行校準或維修。
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